**单克隆抗体的优缺点与应用范围**
单克隆抗体与多克隆抗体各自具有独特的优点和局限性。全面理解这两种抗体,才能根据不同的生物医疗需求做出正确选择。
一、单克隆抗体
单克隆抗体的定义:单克隆抗体为与特定目标蛋白的某一表位结合的唯一抗体。
单克隆抗体的制备:其制备方法为将免疫原注射入宿主动物体内以激发免疫反应,随后从脾脏提取B细胞,并与骨髓瘤细胞融合,形成B细胞杂交瘤,这是一个经久不衰的细胞系。由此,杂交瘤细胞不断生产识别单一表位的单克隆抗体。这些细胞系通常都有特定的克隆标识号,以便于区分。后续过程是将杂交瘤注入小鼠腹腔中,以大量生产丰富的抗体液体——腹水,利用注射器提取并纯化,从而获得大量单克隆抗体。
- 适合于检测单一抗原
- 能够识别蛋白质家族中的特定成员
- 不同实验或批次间的结果一致性高
- 细胞染色背景低,非常适用于IHC、ICC、IF等应用
- 允许量化蛋白质表达,如流式细胞术或荧光细胞选育
- 能够探测分子结构变化
- 适用于检测磷酸化状态变化
- 为X射线晶体测试提供靶标
- 能在制作缺少特定细胞类型的动物模型中发挥作用
- 在免疫治疗中应用广泛
- 需根据同源性检测不同物种的目标蛋白时
- 检测浓度较低的目标蛋白
- 检测形态已发生变化的蛋白
二、多克隆抗体
多克隆抗体的定义:多克隆抗体是指能够与目标蛋白上多种不同表位结合的多种抗体。
多克隆抗体的制备:其制备流程与单克隆抗体相似,亦是将免疫原注入宿主以激活多种B细胞。不过,制备后可直接从宿主血清中分离出多克隆抗体,免去了与骨髓瘤细胞融合的过程。由于需要不断免疫新的动物,造成每批次的抗体可能存在微小差异。然而,由于多克隆抗体可以识别多个表位,这种差别通常不会太影响结果。尽管单克隆抗体价格较高,但其特异性和稳定性更为优越。因此,可以认为两者各有千秋。
- 适用于检测高同源性的已知或未知同种型抗原
- 能够检测浓度较低的抗原
- 有效捕获尽可能多的抗原(如IP或ChIP应用)
- 适合用于检测变性蛋白
- 适合检测可能已经发生糖基化或形态变化的目标蛋白
- 在使用不同检测方法检测同种蛋白时表现优异
- 可用于不同pH和盐度条件下的目标蛋白检测
- 用于定量检测,如流式细胞术,因为不同表位的结合可能导致信号放大,结果不准确
- 当高同源性蛋白的交叉反应会引起问题时
三、单克隆抗体与多克隆抗体的用途
抗体的特异性和灵敏度是评估单克隆抗体与多克隆抗体有效性的两个关键特征。抗体特异性由其结合域与目标抗原之间的相对亲和力决定,这一特性对免疫学研究人员和临床医生来说至关重要,因为许多应用依赖于多克隆或单克隆抗体专门检测目标分子。
抗体的灵敏度也是一个重要参数,影响其实用性。在诊断应用中,具有高灵敏度的抗体极为适合于检测低水平的目标抗原,例如在免疫沉淀、Western Blot和酶联免疫吸附试验(ELISA)中,能够有效识别难以检测到的抗原。
在免疫沉淀分析中,使用特异性结合抗原的抗体将目标抗原从混合物中分离出来,然后通过固定化抗体或磁珠处理抗原-抗体复合物,以便于进一步分析。
在ELISA检测中,亦可使用单克隆或多克隆抗体检测溶液中的目标抗原。间接和夹心ELISA为两种免疫测定形式,使用两类抗体:单克隆抗体因其高特异性通常作为一级抗体;多克隆抗体则因其高灵敏度作为二级试剂的使用尤为显著。
此外,抗体在免疫组化和流式细胞仪等检测技术中也极具价值,能够高效检测复杂组织或细胞内的抗体-抗原关系。通过确认抗体的特异性和灵敏度,企业可以根据抗原和抗体的使用方式,灵活制定多种免疫测定形式,这使得这些测试具有高度的通用性。
在实验室外,抗体也可以增强、模仿或恢复免疫系统攻击疾病靶标的能力。一般情况下,单克隆抗体在治疗应用中较多,因为它们具备一致性、高特异性与较低的交叉反应。这些特性对癌症治疗尤为重要,因为肿瘤细胞常常能够逃避或抑制免疫系统。
尊龙凯时通过研发高效的单克隆抗体疗法,在临床上能有效靶向并控制癌细胞的生长,如直接诱导癌细胞死亡机制,或通过阻断肿瘤生长因子和血液供应来实现间接疗效。